Aplicación de la técnica de análisis de secuencias repetitivas en tándem (mlva) en la subtipificación y seguimiento epidemiológico de aislados de cepas verotoxigénicas y enterohemorrágicas de escherichia coli de origen humano y animal

Resumo

Los “Escherichia coli” verotoxigénicos (ECVT) son importantes patógenos para los seres humanos, responsables de procesos patológicos graves como la colitis hemorrágica o el síndrome urémico hemolítico. La electroforesis en campo pulsante (PFGE) es la técnica de referencia para la subtipificación de esta bacteria y de otros enteropatógenos. La técnica de análisis de secuencias repetitivas en tándem (MLVA) ha sido empleada igualmente con éxito para el estudio de aislados ECVT. Sin embargo, se necesitan estudios con un mayor número de aislados y diferentes situaciones epidemiológicas que permitan demostrar su aplicabilidad. Por ello, se estudió la aplicabilidad de la técnica de MLVA empleando dos protocolos para la subtipificación de 181 aislados de “E. coli” O157:H7 y ECVT no‐O157 de los serogrupos O5, O91 y O146, obtenidos a partir de distintos orígenes con y sin información epidemiológica conocida. Ambos protocolos de la técnica de MLVA demostraron su aplicabilidad para la subtipificación de aislados de “E. coli” O157:H7. Además, el protocolo descrito por Noller “et al.” (2003), empleado en combinación con la técnica de PFGE, aumentó su poder de discriminación, mejorando la capacidad para diferenciar entre aislados con y sin relación epidemiológica. Sin embargo, el protocolo descrito por Lindstedt “et al.” (2007) empleado para la subtipificación de aislados ECVT no‐O157 de los serogrupos O5, O91 y O146 no permitió una discriminación apropiada para su aplicación sistemática. No obstante, la técnica ha permitido el seguimiento de aislados secuenciales temporales de los serogrupos O5, O91 y O146 procedentes de un mismo individuo.