Estructura antigénica de la proteína E2 del virus de la gastroenteritis porcina transmisible
- Correa Otero, Isabel
- Luis Enjuanes Director
Universidade de defensa: Universidad Autónoma de Madrid
Fecha de defensa: 12 de decembro de 1988
- Benito José Regueiro García Presidente
- Enrique Méndez Cormán Secretario/a
- José Antonio Melero Fondevilla Vogal
- José María Almendral del Río Vogal
Tipo: Tese
Resumo
Con anticuerpos monoclonales (acms) neutralizantes se ha determinado que la proteina e2 es el antigeno critico dominante en la neutralizacion del virus de la gastroenteritis porcina transmisible (virus gpt). Esta proteina se ha purificado y en ella se han definido cuatro sitios antigenicos (a, b, c y d) por radioinmunensayo competitivo acms, y 11 epitopos. El sitio antigenico a es critico en neutralizacion e inmunodominante, consta de 3 subsitios antigenicos y un minimo de 8 epitopos. En esta proteina existen, al menos, otros tres sitios criticos, los cuales son significativamente menos inmunodominantes que el sitio antigenico a. Los sitios antigenicos a, b, c y d, definidos por acms de raton, son relevantes en la respuesta inmune inducida por el virus gpt en el cerdo, su hospedador natural. Los estudios de inmunogenicidad y antigenidad del sitio antigenico a, critico en neutralizacion, indican que es altamente dependiente de conformacion. Los sitios antigenicos no criticos en neutralizacion son sensibles (sitio b), parcialmente resistentes (sitio d) o resistentes a la desnaturalizacion con dodecil sulfato sodico y 2-mercaptoetanol (sitio c). La formacion de los sitios antigenicos a y b es dependiente de glicosilacion, mientras que la de los sitios antigenicos c y d es independiente y parcialmente dependiente de glicosilacion, respectivamente. La respuesta inmune frente a la proteina e2 se dirigio contra el 27% de la molecula, siendo el resto de la proteina poco inmunogenica, ya que los sitios antigenicos inmunodominantes se localizaron en el extremo amino-terminal, coincidiendo con la porcion globular de la molecula, que es la zona mas expuesta de la proteina e2. Concretamente, el sitio antigenico a se encuentra en los 297 primeros aminoacidos de la proteina. El sitio antigenico b esta formado por aminoacidos localizados entre los residuos 326 y 378. Los acms especificos para el sitio antigenico c reconocen una secuencia que