Caracterizacion intraespecífica de aislados de vibrio alginolyticus procedentes de peces marinos cultivados

Resumo

Vibrio alginolyticus se aisla frecuentemente a partir de epizootias ocurridas enpeces cultivados en el Sur de España, por lo que el estudio de este patógeno es de gran interés. Los objetivos planteados en elpresente estudio han sido caracterización intraespecífica y la evaluación de la patogenicidad de 34 aislados de V. Alginolyticus procedentes de peces enfermos cultivados. La caracterización intraespecífica se ha realizado a nivel bioquímico y fisiológico; mediante estudios de los perfiles de proteínas de membrana externa OMPs y LPS; a nivel serológico (mediante aglutinación en portaobjetos y ensayos de dot blot), y anivel molecular, analizando el contenido plasmídico, el ribotipado con las enzimas de restricción HindIII y SalI, y los perfiles de restricción del ADN cromosómico, empleando la enzima NotI y separando los fragmenteos mediante PFGE. Ninguno de los métodos de tipificación empleados ha permitido establecer una relación ni con el origen ni con la virulencia de los aislados de V.alginolyticus. Ensayos de infección de doradas por baño han mostrado que V.alginolyticus es capaz de producir infección en dorada siendo la vía de tr asnmisión el agua de mar. Los síntomas que se preproducen en las infecciones experimentales son similares a los manifestados en la infección natural. En la virulencia de V. Alginolyticus podrían estar implicados los productos extracelulares que poseen actividades hidrolíticas y citotóxicas para macrófagos y una línea celular de dorada. El diseño experimental de un método colorimétrico basado en la reducción del compuesto MTT a nivel mitocondrial ha permitido cuantificar la actividad citotóxica, obteniendo un índice que relaciona la concentración de proteína de los productos extracelualres conel porcentaje de mortalidad de células de una línea celular de dorada. Por último se han estudiado los mecanismos de captación de hierro en V. Alginolyticus. Esta ba