Procesamiento proteolítico limitado por acción del proteasoma 20S

Resumo

El proteasoma es la principal proteasa extralisosomal responsable de la mayor parte de la proteolisis celular, tanto dependiente como independiente de ubiquitinilación. El proteasoma 20S es un heteroligómero, alfa7beta7beta7alfa7, con estructura de cilindro compuesto de cuatro anillo. Habitualmente el proteasoma produce la degradación total de proteínas sustrato a oligopéptidos. Este trabajo se centra en la caracterización de la actividad proteolítica limitada del proteasoma 20S. Esta actividad se manifiesta en el procesamiento de los precursores de las subunidades beta del proteasoma. Este procesamiento ocurre en cis para las subunidades pro-beta activas y en trans para las pro-beta inactivas. Hemos demostrado que la subunidades beta pro-C5 (inactiva) se sintetiza libre en la célula y su procesamiento está acoplado al proceso de ensamblaje en el complejo del proteasoma, no existiendo pro-C5 asociada a precursores de proteasomas. Hemos caracterizado una nueva actividad del proteasoma, el autoprocesamiento por una reacción intermolecular entre proteasomas (procesamiento limitado post-ensamblaje) del extremo C-terminal de la subunidad alfa C2 inducido por la proteína básica de la mielina. Finalmente, hemos identificado un nuevo sustrato que sufre proteolisis limitada en lugar de degradación, la proteína tirosina quinasa p60c-Src. Esta tirosina quinasa es procesada por el proteasoma en su extremo N-terminal, produciendo una disminución de la actividad quinasa y una perdida de la región necesaria para su localización en membranas. El hecho de que la variante oncogénica, v-Src, no sea procesada por el proteasoma sugiere que esta proteólisis diferencial puede ser un mecanismo adicional que contribuye a la transformación celular por Src.