Metabolismo del azufre inorgánico en la microalga eucariótica chlamydomonas reinhardtii

Resumo

El consumo de sulfato por chlamydomonas reinhardtii depende de energía metabólica, esta mediado por permeasas especificas, se induce por carencia de azufre y se inhibe por análogos estructurales de sulfato, como cromato o seleniato, y por especies mas reducidas de azufre como el sulfito o el tiosulfato, que presenta una inhibición competitiva con una ki de 0,0 mm.A partir de extractos crudos de c. Reinhardtii se ha purificado una enzima con actividad tiosulfato-ditiol sulfotransferasa (tsr) y tiosulfato-cianuro sulfotransferasa (rodanasa, rdn). Ambas actividades son cuantitativamente equivalentes, y estudios cinéticos indican que el dte y el cianuro compiten por el mismo sitio activo de la enzima, teniendo una actividad 28 veces mayor por dte. Estudios de inhibición indican que presente al menos un residuo de arginina. Se han separado por primera vez en este alga tres isoenzimas con actividad o-acetil-l-serina (tiol)liasa (oass). El proceso de purificación consiste fundamentalmente en una cormotografía en deae-sefacel, donde se separa la primera isoenzima (oass1), y una cromotografía en fenil-sefarosa que separa las otras dos (oass2 y oass3). Las actividades especificas fueron 10,7; 19,8 y 2,0 u/mg prot.; Respectivamente. Oass1 fue la que mostro mayor afinidad por o-acetil-l-serina (oas), siendo la km 2,5mm, mientras que para sulfuro, el otro sustrato de la reacción, la masa afín fue oass3 con un valor de km de 0,75mm. La l-metionina se mostro inhibidor competitivo respecto a las oas para las tres isoenzimas.