Aplicación de técnicas fenotípicas y de biología molecular para la detección de factores de virulencia en e. Coli

Zusammenfassung

EN ESTE TRABAJO SE HAN ESTUDIADO LA RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS, LA EXPRESION DE ADHESINAS, LA PRODUCCION DE HEMOLISINA, AEROBACTINA Y PRESENCIA DE CAPSULA EN 123 CEPAS DE E. COLI AISLADAS DE INFECCIONES URINARIAS DE PACIENTES EXTRAHOSPITALARIOS DE LA COMUNIDAD AUTONOMA VASCA. UTILIZANDO DIVERSAS TECNICAS FENOTIPICAS Y DE BIOLOGIA MOLECULAR. ENTRE LAS PRIMERAS SE HA REALIZADO PRUEBAS DE HEMAGLUTINACION PARA DETERMINAR PATRONES MRHA QUE SE RELACIONAN CON LA PRESENCIA DE FIMBRIAS Y ENSAYOS DE AGLUTINACION ESPECIFICA PARA LA DETECCION DE LA FIMBRIA P. PARA LA DETECCION GENOTIPICA SE HAN UTILIZADO CUATRO SONDAS DE DNA A PARTIR DE CEPAS DE E.COLI QUE ALBERGAN LOS PLASMIDOS RECOMBINANTES QUE DETERMINAN PARA LA EXPRESION DE LOS FACTORES DE VIRULENCIA ESTUDIADOS. LAS SONDAS SE HAN MARCADO CON EL METODO RANDOM PRIMER INCORPORANDO DUTP-BIOTINA. LA HIBRIDACION DEL DNA SE PONE DE MANIFIESTO MEDIANTE REVELADO CON ESTREPTAVIDINA FOSFAATASA ALCALINA. RESULTADOS: SE HAN DETECTADO EL 66% Y 73% DE CEPAS QUE HIBRIDAN CON LA SONDA PARA LA PRODUCCION DE AEROBACTINA Y CAPSULA COMUN RESPECTIVAMENTE. PATRON MRHA (36/123) PFTEST+(29/123) HIBRIDACION PAPL (71/123) HIBRIDACION PAP2 (45/123). COMO CONCLUSIONES, CONSIDERAMOS QUE LAS TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PROPORCIONAN UNA HERRAMIENTA UTIL PARA DISCRIMINAR CON FACILIDAD Y EN POCO TIEMPO CEPAS CON DIVERSOS FACTORES DE VIRULENCIA. AL COMPARAR LAS TRES TECNICAS ESTUDIADAS PARA LA DETECCION DE LAS FIMBRIAS P, SE HA ENCONTRADO ASOCIACION ESTADISTICA ENTRE LA UTILIZACION DE SONDAS Y PFTEST, ASI COMO ENTRE LAS PRUEBAS GENOTIPICAS Y LOS PATRONES DE HA.