Alteraciones del gen del retinoblastoma (rb-1) en sarcomas humanos

Abstract

EL GEN RETINOBLASTOMA (RB) ES EL PRIMER GEN SUPRESOR IDENTIFICADO Y SE ENCUENTRA ALTERADO NO SOLO EN LOS RETINOBLASTOMAS SINO TAMBIEN EN OTROS TIPOS DE NEOPLASIAS, PRINCIPALMENTE EN SARCOMAS HUMANOS. EL OBJETO DE ESTA TESIS, ES ESTUDIAR ALTERACIONES DEL GEN RB EN UN GRUPO DE SARCOMAS, MEDIANTE UNA TECNICA DE APLICACION SENCILLA PARA EL DIAGNOSTICO. DADO EL GRAN TAMAÑO QUE TIENE EL GEN RB, HEMOS APLICADO LA TECNICA DE LA PCR, ELIGIENDO 6 PAREJAS DE INICIADORES QUE PERMITEN ESTUDIAR LA TOTALIDAD DEL GEN MEDIANTE 6 REACCIONES DE AMPLIFICACION. DE ENTRE LOS 87 SARCOMAS ESTUDIADOS, SOLO PRESENTAN ALTERACIONES EL GRUPO DE LOS OSTEOSARCOMAS, CON UNA INCIDENCIA DEL 30.8%, SIMILAR A LA DESCRITA POR OTROS AUTORES. PARA CONOCER CON MAS DETALLE ALGUNAS DE LAS ALTERACIONES ENCONTRADAS, SE UTILIZO LA TECNICA DE SECUENCIACION. ASI, SE DEMUESTRA QUE EN DOS CASOS EXISTEN MUTACIONES PUNTUALES EN LAS REGIONES DE CONTROL DE SPLICING QUE HACEN QUE SE PIERDA UN EXON COMPLETO EN EL RNA, PROVOCANDO CAMBIOS EN LA PAUTA DE LECTURA DEL MISMO, QUE PRODUCEN UN FINAL PREMATURO DE LA SINTESIS DE LA PROTEINA RB. EN OTRO CASO SE PRODUCE UNA DUPLICACION DE 4 EXONES QUE TAMBIEN PROVOCA UNA PROTEINA TRUNCADA. MEDIANTE LA TECNICA WESTERN BLOT SE CONFIRMA QUE TODOS LOS CASOS QUE MOSTRARON ALTERACION MEDIANTE LA TECNICA RT-PCR, NO EXPRESAN LA PROTEINA RB DE TAMAÑO CORRECTO. LA TECNICA DE LA RT-PCR PERMITE DETECTAR DE MANERA RAPIDA Y SENCILLA LAS ALTERACIONES QUE SE PRODUCEN EN LA EXPRESION DEL GEN RB.