Implementacion de los métodos de diagnóstico en la enfermedad de Fabry

Abstract

La Enfermedad de Fabry (EF) es una enfermedad de depósito lisosomal de herencia ligada al cromosoma X, debida a un déficit de alfa-galactosidasa A (α-GalA) que produce la acumulación de globotriaosilceramida (Gb3) y otros glucoesfingolípidos naturales en el endotelio vascular de diversas células provocando manifestaciones clínicas a nivel oftalmológico (córnea verticilata), cardiaco (miocardiopatía hipertrófica), neurológico (infartos cerebrales, acroparestesias) y renal (insuficiencia renal terminal). La importancia del diagnóstico precoz radica en el inicio temprano (fases presintomáticas) de la terapia enzimática sustitutoria (TES) con el fin de evitar las complicaciones tardías y reducir la morbilidad y mortalidad. El diagnóstico inicial habitualmente se realiza determinando la actividad enzimática de α-GalA y en aquellos casos en los que se objetive deficiencia se lleva a cabo la secuenciación del gen GLA. Esto no es suficiente para llegar a un diagnóstico de EF preciso en los casos dudosos en los que se hayan detectado defectos genéticos validados hasta la fecha como no patológicos y se encuentren en fases presintomáticas. Es en estos casos donde el estudio de niveles de Ácido Ribonucleico mensajero (mRNA) y proteína puede aclarar el diagnóstico y determinar el inicio de TES de forma precoz. Como parte inicial del estudio se ha llevado a cabo un programa de cribado neonatal de EF entre todos los recién nacidos de la comunidad de Galicia en el año 2008 (14600 sujetos en total) obteniendo una prevalencia de Enfermedad de Fabry en varones de 0.013% (1:7575). En este mismo programa de cribado se ha objetivado un número importante de sujetos que presentan baja actividad enzimática α-GalA y variantes de significado incierto (GVUS) en el gen GLA. En aquellos sujetos de nuestra área sanitaria, provenientes de dicho programa de cribado neonatal portadores de GVUS en el gen GLA se determinó globotriaosilesfingosina (LysoGb3)/mRNA/Cantidad de proteína/ metilación y se comparó con una muestra control de la misma área sanitaria, nacidos también en el año 2008 y sin alteración en el gen GLA. En total se analizaron 12 sujetos portadores de GVUS (polimorfismos y haplotipos combinados en secuencias intrónicas). Ninguno de estos pacientes presentaba en el momento de realizar el estudio manifestaciones clínicas sugestivas de EF. Se objetivó, en alguno de estos sujetos acúmulo de glucoesfingolípidos y alteraciones en el patrón de metilación [en sujetos portadores de la variante p.(Ala143Thr)] así como alteraciones en la expresión génica [sujetos portadores de la variante p.(Ala143Thr) y sujetos portadores de haplotipos combinados en secuencias intrónicas] lo que hace conveniente realizar un seguimiento evolutivo de estos pacientes para, según la evolución, valorar realizar nuevos estudios complementarios (incluyendo determinación de Gb3 tisular) a fin de incluir o no de forma más inequívoca en el grupo de los pacientes con EF e iniciar, de ser el caso, TES lo más precozmente posible.