Estudio funcional de la subunidad ikkalpha, miembro del complejo ikb quinasa, y cyld en la fisiopatología cutánea

Resumo

La epidermis es un epitelio estratificado escamoso constituido por un estrato basal de células proliferativas que cesan en su proliferación, migran hacia la superficie y experimentan un programa de diferenciación terminal para convertirse en la cubierta cornificada de la piel. Las alteraciones en el control de la proliferación y diferenciación epidérmica llevan a diversas patologías, siendo el cáncer de piel el tumor más frecuente en occidente. En este sentido, los avances en el conocimiento de los mecanismos moleculares implicados en la diferenciación de los queratinocitos son importantes para comprender los mecanismos que controlan la diferenciación de los tumores de piel y la génesis de las distintas variantes histológicas tumorales. El complejo IKK y la vía de señalización de NF-kB desempeñan un papel central en el mantenimiento del equilibrio entre la proliferación y la diferenciación de la piel. Además, la subunidad IKKa del complejo IKK y el gen supresor tumoral cutáneo CYLD (regulador negativo de la vía de NF-kB) se han relacionado con la formación de tumores epiteliales. %&/Respecto a IKKa, el conocimiento de las vías de señalización responsables de su función en diferenciación es limitado debido a la muerte perinatal que sufren los animales deficientes en esta subunicad, tanto los knockout como su delección específica en epitelios estratificados. Por esta razón, es necesario abordar su estudio mediante nuevos modelos adicionales a los ya descritos. Por otro lado, no está claro el papel que desempeña en el desarrollo tumoral, ya que se han publicado resultados contradictorios. Para investigar los mecanismos por los que IKKa ejerce su función en el control de la diferenciación terminal de los queratinocitos y esclarecer el papel que desempeña en tumores cutáneos, estudiamos las consecuencias de la sobreexpresión de IKK en líneas celulares de queratinocitos y en tumores epidérmicos. Nuestros estudios indican que IKKa promueve la diferenciación de los queratinocitos por un mecanismo dependiente de cadherina-E. Además, IKKa incrementa la proliferación celular de queratinocitos en cultivos convencionales en monocapa y promueve actividades proteolíticas y la invasión de los queratinocitos en equivalentes de piel. El aumento en los niveles de expresión de IKKa induce también un peor pronóstico de los tumores originados en los diversos estudios realizados de carcinogénesis epitelial. Estos datos sugieren un papel de IKKa como promotor de malignidad tumoral. Por otro lado, nuestros resultados también sugieren que IKKa es responsable de la aparición de una de las variantes de SCCs, el SCC acantolítico o pseudoglandular, que presenta un comportamiento más agresivo que los SCCs convencionales. Estos tumores cursan con una elevada expresión de IKKa y cadherina-E, asociada a una disminución de queratinas K1 y K10. Este patrón de expresión podría ser útil en el diagnóstico diferencial de esta variante tumoral.%&/Aunque se desconoce el papel que desempeña CYLD en la morfogénesis epidérmica, se ha establecido su implicación en el desarrollo de tumores benignos de la piel tanto en humanos como en modelos murinos. Estos estudios describen el papel de CYLD en células no tumorales, heterocigotas para una mutación en CYLD y en las que la pérdida del alelo wt induce el crecimiento de formas neoplásicas benignas. En este trabajo de investigación nos hemos planteado conocer las consecuencias que tendría una mutación en CYLD en células que previamente han sufrido una mutación que las hace tumorales. Nuestros estudios indican que la expresión de una forma mutante de CYLD, que actúa como dominante negativo de la forma salvaje y se encuentra en algunos pacientes de cilindromatosis hereditaria, incrementa el potencial proliferativo de células epidérmicas tumorales, además de su capacidad de crecer en suspensión. Del mismo modo, su expresión aumenta la agresividad de los tumores de piel inducidos en ratones inmunodeficientes, lo que apoya la idea de que CYLD se comporta en piel como supresor de la malignidad tumoral. Además, nuestros datos sugieren que el dominante negativo de CYLD incrementa las propiedades tumorigénicas de células en cultivo y de SCCs por un mecanismo independiente de la vía clásica de NF- B, probablemente por inducción de la expresión de factores angiogénicos como VEGF y trombospondinas 1 y 2.