Simultaneous determination of six analgesics in human plasma using solid-phase extraction and liquid chromatography

Resumen

Se desarrolló un método analítico para la determinación simultánea de paracetamol, ácido salicílico, metamizol, tramadol, ibuprofeno y diclofenaco en plasma, usando Cromatografía Líquida de Alta Resolución acoplada a un detector de array de diodos (HPLC-PDA). Se realizó una extracción en fase sólida (SPE) con cartuchos Oasis HLB®. Después de acondicionar los cartuchos con acetato de etilo, metanol y tampón fosfato pH 4, e introducir la muestra de plasma, los analitos fueron eluídos con acetato de etilo; el extracto se evaporó a sequedad, se redisolvió en fase móvil y se inyectaron 30 μL en el cromatógrafo. La separación cromatográfica fue realizada usando una columna XBridgeTM Shield RP18 (250x4.6 mm id, 5 μm tamaño partícula), y la elución se hizo con una fase móvil, compuesta por acetonitrilo, tampón fosfato pH 6,0 y agua Milli-Q, a un flujo de 1 mL/min, en modo gradiente. La respuesta del detector es lineal en el rango 0,1-20 μg/mL en plasma, con coeficientes de correlación mayores de 0.997. Los límites de detección variaron desde 7,3 a 30,1 ng/mL. Los coeficientes de variación fueron menores de 8%, y las recuperaciones oscilaron entre 90,1% para diclofenaco y 100,2% para ácido salicílico. Finalmente, se aplicó el método a 16 muestras de plasma procedentes de sujetos intoxicados con uno o más analgésicos.