Formulacion de esporas de hongos parasiticidas en pellets nutricionales

  1. ARROYO BALÁN, FABIÁN LEONARDO
Dirixida por:
  1. Maria Sol Arias Vázquez Director
  2. Pedro Mendoza de Gives Director
  3. Adolfo Paz Silva Director

Universidade de defensa: Universidade de Santiago de Compostela

Fecha de defensa: 28 de xullo de 2017

Tribunal:
  1. Marta Alonso de la Varga Presidente/a
  2. Marta Inés Miranda Castañón Secretaria
  3. Sèrgio Ramalho Sousa Vogal
Departamento:
  1. Departamento de Patoloxía Animal

Tipo: Tese

Resumo

El control de parásitos que afectan a animales requiere de mayor investigación sobre procedimientos para prevenir su infección y reducir la administración de antiparasitarios a aquellas situaciones estrictamente necesarias. En el primer ensayo que consistió en añadir esporas del hongo sobre huevos de Calicophoron daubneyi en placas Petri, heces de ganado vacuno, y en solución acuosa. A partir del día 6 se detectó crecimiento de micelio, y que las hifas se adherían a la cubierta, penetraban y destruían el interior, concluyéndose que se trataba de un efecto ovicida de tipo 3. Sobre heces de bovinos que eliminaban huevos de C. daubneyi, se añadieron diferentes soluciones de esporas (106, 2 106, 3 106 y 4 106), que se mantuvieron durante 50 días en cajas colocadas en un prado arbolado. Mediante sedimentación se comprobó que los huevos no embrionados disminuían de forma significativa a partir del día 16, y que aparecían los embrionados entre los días 16-20. También se demostró un incremento en los recuentos de huevos no viables hasta el final del ensayo. El porcentaje de huevos expuesto a M. circinelloides que contenían un miracidio resultó la mitad que en los testigos. No se encontraron diferencias entre las diferentes concentraciones de esporas empleadas. En el segundo ensayo se incubaron soluciones acuosas con 2·103 esporas de M. circinelloides a una temperatura de 72ºC durante 10 segundos, 30 segundos y 1, 2, 5 y 10 minutos. A continuación se sembraron en placas Petri con agar-trigo, que se mantuvieron en estufa a 25ºC y oscuridad durante 20 días. Al emplear las esporas expuestas a 72ºC durante un periodo inferior a 10 min, el desarrollo de micelio se hizo evidente a partir del cuarto día, y la producción de esporas del octavo en adelante. El porcentaje de viabilidad de los huevos de F. hepatica se redujo en un 21-63%, y la P. equorum en un 11-66%. Estos porcentajes resultaron significativamente superiores a las de los testigos (no exposición) y a las incubadas durante 10 min. En la fábrica de NANTA en Begonte (Lugo, España) se elaboraron pellets con esporas de M. circinelloides para la alimentación de caballos (Forequus®) y de ganado vacuno de recría (Recria 18®). En estos concentrados se observó crecimiento de las hifas a partir del cuarto día. Al estudiar la actividad ovicida del hongo incluido en los pellets, se detectó que la viabilidad de los huevos de F. hepatica se reducía en un 54-58%, y la de los huevos de P. equorum en un 61-67%. En el tercer ensayo se llevó a cabo una prueba similar a la anterior, pero empleando el hongo atrapanematodos D. flagrans. El crecimiento del micelio se midió cada cinco días en cuatro placas de cada grupo de temperatura, incluido el grupo control. Para evaluar la actividad parasiticida de las esporas sometidas a estrés térmico, se obtuvieron larvas L3 de estróngilos a partir de huevos excretados en las heces de caballos con infección natural. En el centro de las placas Petri sembradas con esporas sometidas a 72ºC durante diferentes intervalos de tiempo, se añadieron 500 L3. Transcurridos 15 días a 25ºC y oscuridad, las placas se observaron al microscopio para cuantificar la formación de trampas. Finalmente, el agar se colocó en un dispositivo Baermann para recuperar las larvas por la técnica de migración. De este modo, se comprobó que en las placas que tenían esporas expuestas a 72ºC menos de 10 minutos, el número de L3 recuperadas disminuyó de forma significativa (94-97%) (χ2= 26,187, P= 0,001). La cantidad de L3 en las placas con esporas calentadas durante 10 minutos fue similar a la de las placas control (χ2= 0,795, P= 0,373). De los resultados obtenidos en el presente trabajo se concluyó que Mucor circinelloides desarrolla un efecto ovicida de tipo 3 sobre los huevos del trematodo ruminal Calicophoron daubneyi, incluso en medios acuosos, previniendo así la aparición de miracidios y disminuyendo el riesgo de infección por este trematodo. La resistencia de las esporas de M. circinelloides y D. flagrans a las condiciones de elaboración industrial de concentrado comercial hace posible su inclusión durante la fase de mezcla. De este modo, se obtiene un producto en el que no resultan afectadas las propiedades biológicas de los hongos (morfogénesis, esporogénesis) ni su actividad parasiticida. Finalmente, destacar la ausencia de efectos indeseables (olores o consistencia extraña, crecimiento de hifas) en el almacenamiento de los pellets durante el periodo de caducidad de este producto comercial.