Activación de las plaquetas humanas mediante incrementos de calcio citosólico inducidos por agentes ionóforos

Resumo

Se ha realizado un estudio detallado de las diferentes etapas de la activación de las plaquetas sanguíneas humanas tras la estimulación de estas células con dos inonóforos del calcio, el A23187 y la inonomicina. Este estudio se planteó con el fin de contribuir a obtener información útil que ayude a conocer los procesos de activacion plaquetaria, y consecuentemente, a desarrollar sustancias capaces de regular farmacológicamente dichos procesos. Los resultados obtenidos indican que la estimulación de las plaquetas con los dos agentes ionóforos del calcio estudiados da lugar a dos respuestas diferentes dependiendo de la concentración de ionóforo utilizada: una respuesta de agregación obtenida con concentraciones de A23187 entre 50 y 100 nM con concentraciones de ionomicina entre 25 y 50 nM y otra respuesta en la que no existe formación de agregados de plaquetas, pero sí microvesiculación, obtenida con concentraciones de 1 uM de A23187 y 0.5 uM de ionomicina. La respuesta de agregación se caracteriza por un aumento en la transmisión de luz (método de Born) y en la impedancia (método de Cardinal y Flower) así como por la unión de fibrinógeno a su receptor. En estas condiciones de estimulación hay un incremento inicial de la concentración citosólica de calcio que posteriormente alcanza un valor estable mantenido por la actividad de la SERCA. También se da un aumento de la fosforilación de proteína en residuos de tirosina que es el resultado del aumento de las actividades tirosín-kinasa y tirosín-fosfatasa.Los inhibidores de tirosín-kinasas inducen un incremento de la respuesta de agregación observada con los ionóforos del calcio al causar la inhibición de la SERCA, lo que provoca una potenciación en el aumento de los niveles citosólicos de calcio y la consiguiente activación de la calpaína. Esta respuesta de agregación inducia por los ionóforos de calcio va acompañada por la liberación de 5-hidroxitr