Efecto del ion Na+ sobre la respuesta secretora de los mastocitos de rata

Abstract

El ion Na+ es un componente fundamental del liquido extracelular. Sin embargo, su papel enla fisiología de las celulas no excitables ha sido poco estudiado. Los mastocitos de rata son celulas mononucleares granuladas que derivan de precursores hematopoyeticos. Sus granulos contienen histamina y otros mediadores de la inflamación que se liberan mediante un proceso de exocitosis facilmente cuantificable, por lo que es un modelo de celulas no excitable ampliamente utilizado en estudios de señales de transducción. El papel de calcio en el proceso de secreción ha sido ampliamente estudiado, sin embargo, el papel de los iones monovalentes es menos conocido. El objetivo de este trabajo es estudiar el papel del ion Na+ en la fisiologia del mastocito de rata y su relacio con el Ca2+ y el pH celular en el proceso de secreción. Para ello se estudio el efecto de la modificación de la concentracion intra y extracelular de Na+ sobre la exocitosis y la concentracion intracelular de calcio y el pH citosólico, asi como su relación con otras señales de transducción, principalmente la fosforilacion de Ser/Thre. La respuesta secretora de los mastocitos se determinó como liberación de histamina inducida por dos estímulos cuya respuesta secretora es dependiente de calcio extracelular: el ionóforo de calcio A23187 y el inhibidor de la ATPasa de calcio citosolica thapsigargina. Los estudios de calcio citosolico y pH intracelular se realizaron mediante tecnicas de microscopia de fluorescencia con los indicadores fluorescentes Fura-2 y BCECF, respectivamente. La relación con otras señales de transduccion se estudio mediante el empleo de moduladores farmacologicos de la ruta del AMP ciclico y la proteina cinasa C. La estimulacion de los mastocitos de rata en ausencia de sodio extracelular provoca una mayor liberacion de histamina. La inhibición de la bomba Na+/k+ ATPasa produce un aumento de la concentracion intracelular de Na+ y de la secre