La protimosina [alfa] es una proteína que remodela la cromatina interaccionando con la histona H1

Abstract

La Protimosina alfa (ProT) es una proteína acídica nuclear, ampliamente distribuida en tejidos de mamíferos cuya expresión está asociada a los procesos de proliferación y diferenciación celular. En la presente Tesis Doctoral intentamos aproximarnos al conocimiento de la función biológica de la ProT. Para ello, transfectamos células HL-60, una línea celular humana leucémica mieloide, con vectores que expresan el RNA con sentido y antisentido de la ProT. Nuestros resultados indican que la sobreexpresión de la ProT provoca una importante inhibición del proceso de diferenciación en las células HL-60. Además, la sobreexpresión de la ProT provoca un incremento en la tasa de proliferación y en la tasa de síntesis de DNA, mientras que la inhibición de la expresión de la ProT provoca el efecto opuesto. El análisis de las fases del ciclo celular reveló que la sobreexpresión de la ProT causa un acortamiento en la duración de la fase G1. Por otra parte, el tratamiento de las células HL-60 no transfectadas con oligonucleótidos antisentido de la ProT induce en ellas un mecanismo de muerte celular mediante apoptosis. Finalmente, analizamos el efecto de la ProT sobre la estructura de la cromatina. Encontramos que en las células que sobreexpresan ProT, la accesibilidad de la nucleasa micrococal a la cromatina está fuertemente incrementada. En la escalera de DNA generada mediante la actividad de la nucleasa, el tamaño del mononucleosoma (146 pb, el fragmento de DNA unido al octámero de histonas) y sus multímeros corresponden al de los nucleosomas sin histona H1. El porcentaje de cromatina depleccionada en H1 es superior en las células que sobreexpresan ProT. Basándonos en estos resultados, proponemos una función biológica para la ProT en la remodelación de las fibras de cromatina a través de su interacción con la histona H1.