Polycystic kidney disease (PKD)from the clinical-genetic test, through in vitro and in vivo analysis, and back to humans

Resumo

El objeto de estudio de esta Tesis son dos enfermedades quísticas renales hereditarias. Poliquistosis Renal Autosómica Dominante, siglas en inglés ADPKD (Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease). En ambas se ha establecido la existencia de un componente genético, sin embargo, el estudio molecular se encuentra en diferentes fases en cada una de ellas. Mientras en ADPKD se conocen los genes implicados, su ubicación y anatomía molecular, ARPKD todavía se encuentra en la primera fase de estudio ya que sólo recientemente se ha localizado el gen responsable de la enfermedad. En esta tesis se ha establecido una estrategia racional de búsqueda de mutaciones en los genes responsables de la Poliquistosis Renal y su aplicación en el desarrollo de un test clínico/genético de la enfermedad. En colaboración con Athena Diagnostics, Inc; dicha estrategia ha sido testada en 82 familias con Poliquistosis Renal con un excelente porcentaje de detección del 83%. Meticulosamente, se ha examinado la predicción patogénica de las sustituciones aminoacídicas y alteraciones en el lugar de expansión (splice site) para cada probando. Una fracción sustancial de variantes encontradas en el gen PKD1 también se ha encontrado en sus genes homólogos, posiblemente debido a una conversión génica entre ellos. Evidencias experimentales de esta tesis dan soporte a la idea de que PKD1 es un gen altamente mutable. Se ha observado la existencia de individuos con una gran cantidad de sustituciones aminoacídicas, mientras que otros sólo poseen una pequeña cantidad, sugiriendo que ciertos haptotipos podrían ser más mutables que otros. También, dichos resultados remarcan la precaución que se de tomar, desde un punto de vista clínico, a la hora de distinguir entre una variante con sentido perdido (missense) pero dentro de la normalidad y aquellas que son probables de causar la enfermedad. Se ha identificado un número de individuos con múltiples cambios pero sin que ninguno