Ratones transgenicos y/o sus productos derivados para el estudio de las encefalopatías espongiformes transmisibles

Abstract

Actualmente, la detección de PrPSc es el principio básico para el diagnóstico de las encefalopatías espongiformes transmisibles (EETs). Las técnicas convencionales para la detección de priones no son lo suficientemente potentes para determinar que una muestra está libre de priones. La herramienta más sensible para la deteección de infectividad en muestras sospechosas es el uso de bioensayos basados en ratones. Teóricamente, y debido al fenómeno de barrera de especie, el pase incicial de priones de vaca a roedores requiere de unos tiempos de incubación muy largos y solo se detecta PrPSc en el 40% de los animales. Por esta razón, la vía para obtener el 100% de infectividad es el uso de ratones transgénicos que expresan la proteína homóloga a la del inóculo. Para ello se generaron líneas de ratones transgénicos que expresan diferentes niveles del gen de la PrP bovina. Tras la infección de estas líneas con priones bovinos, se observó degeneración del sistema nervioso central, característica de estas enfermedades mediante histopatología en el 100% de los ratones inoculados confirmando la ausencia de barrera de especie para la infección con encefalopatía espongiforme bovina (EEB). Las diferencias en los tiempos de incubación dependen de los niveles de expresión de la PrPc bovina y de la cantidad de priones presente en el inóculo. En ausencia de signos clínicos, los marcadores de la enfermedad se pudieron detectar a los 150 y 196 días postinoculación mediante el análisis por inmunohistoquímica y western blot, respectivamente. Aunque estos animales fueron susceptibles a la infección con priones ovinos, los tiempos de incubación fueron más largos y solo se pudo detectar PrPSc en el 70% de los animales inoculados. Además, ratones transgénicos que expresan la PrP bovina con la inserción de un octapéptido repetido (7OR en lugar de 6OR) mostraron diferencias durante el curso de la infección con EEB que se re