6-Fosfofructo-1-quinasa de Mytilus galloprovincialisregulación de la actividad enzimática por procesos de fosforilación

Abstract

La 6-fosfofructo-1-quinasa (pfk; Ec 2.7.1.11) purificada a partir de manto del mejillón (mytilus galloprovincialis) puede ser fosforilada tanto "in vitro" como "in vivo" por la proteína quinasa dependiente de AMP cíclico (PKA) procedente del propio molusco. El máximo nivel de fosforilación fue de 1 mol fosfato/mol subunidad PFK. A diferencia de lo que ocurre con la enzima de mamíferos, la fosforilacion de la PFK de mejillón produce un aumento de 3-4 veces en la actividad enzimática ensayada a pH 7.0 y a concentraciones de sustratos próximas a las fisiológicas, lo que sugiere que la fosforilación puede desempeñar un papel importante en la regulación de la enzima "in vivo". La secuencia del fosfopéptido que contiene el sitio de fosforilación se aproxima notablemente a la secuencia consenso mínima reconocida por la PFK. Por otra parte, el estado de fosforilación de la PFK no varia significativamente cuando los moluscos son sometidos a hipoxia; Sin embargo, se observo una variación estacional en el contenido de fosfato así como en los valores de algunos parámetros cinéticos de la enzima. Los resultados sugieren que la fosforilación de la fosfofructoquinasa por la PFK puede desempeñar un papel fundamental en la regulación de la glucólisis durante el desarrollo gametogénico del molusco.