Estudio de la apóptosis en linfocitos de ratón

Resumo

La apoptosis es un proceso de muerte celular controlado que se manifiesta en numerosas poblaciones celulares, destacando por su importancia y extensión en la inmunocapacitación de los timocitos. En nuestro estudio observamos que la apoptosis de los timocitos in vitro puede ser inducida por la elevación de los niveles de calcio citosólico, por concentraciones fisiológicas de glucocorticoides o a través de la activación del complejo TCR-CD3 y que esta actividad desciende a medida que se avanza en la inmunocapacitación de los linfocitos T. Comprobamos que la apoptosis de los timocitos inducida por la elevación de calcio citosólico o por glucocorticoides es dependiente de la síntesis de proteínas y mRNA y que la CyA, un conocido fármaco inmunosupresor, inhibe la muerte apoptótica inducida por la elevación de calcio en timocitos aislados y en timocitos fetales, así como la inducida en estos últimos a través de la activación del TCR-CD3. La importancia del microambiente tímico se pone de manifiesto cuando investigamos cómo los componentes celulares y factores solubles del timo regulan la apoptosis, sobresaliendo la actividad inhibitoria de la IL-1 y la IL-2 cuando este proceso es inducido por la elevación de calcio. El estudio de los mecanismos de transducción que podrían regular la actividad apoptótica de los timocitos muestra la clara participación de la PKC y la PKA dependiente de AMPc en la inducción por la elevación de los niveles de calcio citosólico. Finalmente constatamos que mecanismos de fosforilación/desfosforilación participan en la apoptosis inducida por la elevación de calcio en timocitos al observarse un descenso en la concentración de fosfoproteínas en el rango de Pm de 40 a 12 kDa y repetirse este patrón cuando la activación apoptótica se induce directamente a través de la PKC. Esta variación en la concentración de las fosfoproteínas resulta ser dependiente de la síntes