Técnicas de digestión con elastasa y adenosin trifosfatasa para estudiar un modelo experimental de retinopatía diabéticala rata galactosémica

Abstract

Objetivos: los del presente trabajo han sido analizar mediante la técnica de la elastasa a baja concentración e, innovando, mediante la adenosin trifosfatasa, las alteraciones existentes en el árbol vascular retiniano en un modelo experimental de retinopatía diabética: la rata galactosemica. Método: el estudio se realizó con 40 retinas procedentes de 20 ratas macho, que se mantuvieron bajo una dieta control (n=10) o con una dieta rica en D-galactosa al 50% (n=10) durante 24 meses. Diez retinas procedentes de ratas control y diez procedentes de ratas galactosémicas fueron analizadas mediante la técnica de la elastasa a baja concentración (20 u/ml), y el mismo número de retinas se estudiaron mediante la técnica de la adenosin trifosfatasa (ATPasa). Resultados: mediante ambas técnicas histológicas se obtuvo una excelente visualización de los vasos retinianos, incluso de los capilares más finos. En las retinas procedentes de los animales del grupo control no pudo observarse ningun tipo de alteraciones en el árbol vascular, con el empleo de ninguna de ambas técnicas histológicas. Mediante la elastasa a baja concentración se comprobó perdida de pericitos, tortuosidad vascular, microaneurismas, capilares acelulares y anomalias microvasculares intrarretinianas. Tras el uso de la técnica de la ATPasa en el análisis de retinas procedentes de ratas galactosemicas se encontraron areas de tortuosidad vascular, perdida capilar y microaneurismas. Esta misma técnica, hizo posible la distinción de unas células de aspecto fusiforme, localizadas a nivel de la capa de células ganglionares, que presentaron actividad ATPasa positiva en la membrana nuclear y nucleolar, al igual que múltiples nucleolos. Estas células se observaron de forma esporádica en las retinas procedentes de animales del grupo control, y en gran número en las retinas procedentes de ratas galactosemicas. Conclusiones: tanto la técnica de la elastasa como la de la atpasa permitieron u