Obtención de anticuerpos monoclonales contra el complejo antigénico reconocido por las células NK

Abstract

Las celulas NK son una población heterogénea de linfocitos que ejercen una actividad citotóxica no mediada por la presencia de moleculas de MHC en las celulas diana. Aún no se conocen las moléculas capaces de desencadenar el avento lítico. En el presente trabajo hemos obtenido MABS (CE35, CH35,HA18 y HH11) contra antígenos de superficie de las celulas diana NC-37. Estos mabs interaccionan con receptores presentes en las celulas diana NC-37, K562 y Daudi, provocando inhibición de la actividad lítica mediada por las celulas NK. Este efecto inhibitorio se produce una vez que ha tenido lugar el reconocimiento entre las celula NK y su diana. La concentración relativa de receptores para CE35, CH35, HA18 y HH11 se estudió por citometría de flujo mostrando diferentes niveles de unión en las células analizadas. Las características moleculares del antígeno reconocido por los MABS se estudiaron mediante ensayos de inmunoprecipitación. El anticuerpo HA18 reconoce un antígeno conformacional constituido por tres polipeptidos de 31, 35 y 42 KDA unidos entre si por puentes disulfuro, para formar una molécula compleja de 200 KDA, como demuestran los resultados realizados en ausencia de agentes reductores. Esta estructura no se corresponde con ninguna conocida por lo que podría ser un nuevo receptor de las celulas NK.