Expresión génica de protimosina [alfa] durante la diferenciación y proliferación celularanálisis de la metilación en los procesos de diferenciación, proliferación y desarrollo

Abstract

La protimosina alfa es una proteína de carácter acídico asociada al proceso de la proliferación celular. En el presente trabajo hemos estudiado la relación entre el grado de expresión génica y el proceso de diferenciación celular. Para ello utilizamos varias lineas celulares capaces de ser inducidas a diferenciarse. El análisis de los niveles de mRNA de prot alfa en todas las células estudiadas permitió observar un fuerte descenso en su expresión génica, independientemente del tipo celular y de la vía por la que las células se diferenciaron. Tras analizar los múltiples mecanismos que podrían regular esta variación, comprobamos que con toda probabilidad era debido a un descenso en la tasa de transcripción. Puesto que todas las células al diferenciarse sufrían una fuerte disminución en la expresión génica de prot alfa, estudiamos si la depleccion de la prot alfa intracelular podría inducir su diferenciación. Para ello tratamos celulas HL60 con oligonucleotidos antisentido de prot alfa, no siendo observado ningún efecto sobre su estado de diferenciación morfológico. No obstante este tratamiento indujo la muerte de las células HL60 por un mecanismo de apoptosis. Por tanto, la prot alfa resulta imprescindible para la viabilidad celular, pero su eliminación no afecta al grado de diferenciación celular. Otro aspecto analizado en este trabajo fue la tasa de metilacion de las secuencias genicas de prot alfa en diferentes modelos celulares. Así se estudio su grado de metilación en lineas celulares de origen humano y murino, comprobandose que en todas ellas existia un alto grado de metilacion, característico de cada tipo celular, que no variaba con la diferenciación. De manera análoga, el análisis de metilación de tumores humanos de aparato digestivo permitió comprobar que los tejidos tumorales presentaban en general un menor grado de metilacion que los mismos tejidos en su estado normal. El estudio de la expresion genica de prot alfa en es