Clonación y secuenciación del cDNA de la protimosina alfa humanaexpresión y caracterización preliminar del gen

Resumo

La protimosina alfa (prot) es una proteína acida que se aisló por primera vez de timo de rata. Su extremo n-terminal presenta los 28 aminoácidos de la secuencia de la timosina alfa-1, derivado proteolítico de prot al que se han atribuido funciones relacionadas con el sistema inmune. La actividad mostrada por prot en ensayos de protección contra infecciones en animales y respuesta mixta de linfocitos llevo a proponer una función relacionada con la inmunidad celular. Sin embargo, su presencia en tejidos no relacionados con el sistema inmune y la inducción en la expresión del gen, cuando es estimulado el crecimiento celular, no apoyan una función estrictamente inmunitaria. El cDNA de prot humana fue aislado de una librería de cDNA de células t periféricas humanas para estudiar los niveles de mrna y realizar una caracterización preliminar del gen. Los análisis de hibridación del rna de ratón demostraron que el mrna de prot está presente en todos los tejidos estudiados, aunque en diferentes niveles no correlacionados directamente con el grado de proliferación celular. Timo, ovario, riñón, cerebro y corazón son los órganos con un mayor contenido de mensajero. En el timo, la expresión del mrna de prot es más de 50 veces superior en timocitos que en células estromales. Estudios de hibridación con rna de linfocitos periféricos de sangre leucémica, mostraron que la cantidad de mrna de prot esta incrementado 2-4 veces con respecto a linfocitos no leucémicos, apuntando hacia una expresión ligada al grado de proliferación in vivo. El análisis del DNA humano, digerido con enzimas de restricción, produjo un conjunto de bandas de hibridación que sugiere la existencia de una familia multiétnica para prot. Usando condiciones de hibridación altamente selectivas, se detectó la presencia de secuencias homologas al gen de prot en mamíferos, aunque no en otros vertebrados.