Estudio neuroanatómico del sistema olfativo del pez cebra ("Danio rerio"), con especial atención a sus proyecciones primarias y secundarias

Resumo

Mediante métodos inmunohistoquímicos se caracterizó la expresión de dos proteínas ligantes de calcio, calretinina (CR) y S100, en la roseta olfatoria del pez cebra adulto. Estas proteínas se expresan en diferentes grupos de neuronas sensoriales que, en su conjunto, representan una gran proporción de todas ellas. La doble inmunofluorescencia CR y proteína Gs/olf así como la microscopía inmunoelectrónica para CR revelaron que la mayor parte de las células CR-inmunorreactivas (-ir) eran neuronas de tipo ciliado. Se comprobó que las neuronas receptoras olfatorias inmunorreactivas a la CR y la S100 proyectaban a regiones glomerulares específicas si bien en algunos glomérulos se solapaban ambos tipos de proyecciones. La aplicación de DiI, a regiones glomerulares inmunorreactivas a la CR (ventromediales) y a la S100 (caudoventrales), condujo al marcaje de células similares en su mayor parte a neuronas inmunorreactivas a la CR y la S100, respectivamente. La aplicación de DiI sobre los campos glomerulares dorsomediales, en el que no se expresan CR o S100, condujo principalmente al marcaje de células en cripta en el epitelio olfatorio del pez cebra. Por el contrario, la aplicación del DiI sobre campos glomerulares dorsolaterales, en los que se expresan CR y S100, tuvo como resultado el marcaje de NRO bipolares y ocasionalmente de células en cripta. Las células bulbares eferentes (células mitrales) que contactan con esos campos glomerulares ventromediales y caudoventrales proyectaron hacia diferentes áreas del telencéfalo, teniendo en común su diana final, la zona posterior del área dorsal telencefálica (Dp). Sin embargo, los campos dorsomediales y dorsolaterales, además de proyectar a Dp, proyectan de manera diferencial hacia el telencéfalo ventral, haciéndolo el primero de ellos, hacia la región supracomisural lateral. Desde esta región supracomisural se obtuvo el marcaje de dos glomérulos dorsomediales de gran tamaño que supuestamente reciben proyecciones desde las células en cripta, lo cual indica la existencia de un subsistema olfatorio compuesto de células en cripta que posee proyecciones segregadas. Por otra parte, el uso de anticuerpos frente a la hemocianina de Megathura crenulata (keyhole limpet hemocyanin -KLH) permitió revelar un gran número de células sensoriales en la roseta olfatoria, fundamentalmente de tipo bipolar, incluidas células no inmunorreactivas ni a la CR ni a la S100. Este antisuero también marcó la mayor parte de las proyeciones primarias bulbares y reveló las proyecciones olfatorias primarias extrabulbares que discurren hacia el área ventral telencefálica a través del tracto olfatorio medial, proyecciones confirmadas hodológicamente con el trazador DiI. Uno de los posibles objetivos de estas proyecciones extrabulbares sería la población catecolaminérgica del núcleo supracomisural del área ventral telencefálica. La comparación entre las vías KLH-like-ir y las estructuras reveladas mediante inmunohistoquímica para la FMRF-amida (marcador de las células y fibras ganglionares terminales) indicó que la proyección extrabulbar KLH-like-ir no guardaba relación con aquellas proyecciones asociadas al sistema del nervio terminal.