Terapia génica y celular para la corrección de la Lipodistrofia congénita generalizada

Zusammenfassung

En este trabajo de tesis nos hemos centrado en el desarrollo de una estrategia de terapia génica y celular que permita la corrección de la Lipodistrofia Congénita Generalizada (LCG).Estos pacientes sufren trastornos metabólicos difíciles de manejar como consecuencia de sus bajos niveles en sangre de leptina y adiponectina, compuestos sintetizados y secretados por el tejido adiposo. La presencia de mutaciones en el gen AGPAT2, muy importante en la vía de síntesis de triglicéridos y fosfolípidos, desembocan en la ausencia de ese tejido graso y el desarrollo de la LCG. En nuestros experimentos se han podido establecer las condiciones necesarias para conseguir diferenciar eficientemente fibroblastos procedentes de la dermis de pacientes de LCG a adipocitos (las células que forman el tejido adiposo), para lo cual es necesaria la sobrexpresión del factor PPARg-1 en esas células además de su cultivo en un medio específico. En esas condiciones, se consigue activar la adipogénesis incluso en ausencia del gen AGPAT2 funcional, lo que indica que la activación de PPARg consigue superar ese defecto. Los resultados obtenidos evidencian que los adipocitos generados mediante esta estrategia expresan genes característicos de la adipogénesis y, adicionalmente, son capaces de sintetizar adiponectina y leptina, indicadores de diferenciación adipocítica terminal. Por otro lado, el análisis de los lípidos sintetizados y almacenados por estas células muestra únicamente ligeras diferencias en las especies de triglicéridos encontradas con respecto a las células control, siendo el colesterol y los fosfolípidos equivalentes tanto a nivel cualitativo como cuantitativo en ambos tipos celulares. Los experimentos in-vivo de esta tesis han puesto de manifiesto la capacidad de las células de paciente de LCG corregidas de permanecer de manera estable en pieles bioingenierizadas trasplantadas a ratón, sin provocar ningún efecto tóxico ni tumorigénico sobre el animal. Las propiedades de estas células nos llevan a plantear su uso formando parte de pieles bioingenierizadas como un abordaje terapéutico para el tratamiento de la LCG, que permitiría la reposición de los compuestos que sintetiza el tejido adiposo de los que carecen estos pacientes. La comprobación in-vitro de la eficacia de esta estrategia en células de pacientes de LCG tipo 1 y 2 permite proponer el uso de esta aproximación para la corrección de más de un subtipo de la enfermedad.