Procesamiento de imágenes de microscopia electrónica aplicado al estudio de la estructura de dos adn-helicasas hexamericas representativas

Abstract

Las dna helicasas son enzimas ubicuas con un papel fundamental en todos los aspectos del metabolismo de los acidos nucleicos: replicacion del dna, reparacion, recombinacion y conjugacion, su actividad permite la ruptura de los enlaces de hidrogeno entre las dos hebras de dna doble, provocada por la energia obtenida a traves de la hidrolisis de nucleosidos 5' -trifosfatos (ntps). Presumiblemente, todas las especies en la naturaleza contienen una coleccion de helicasas que participa en muchas, si no todas, facetas del metabolismo del dna. A pesar de su papel importante y de la cantidad de conocimiento bioquimico en la materia, se sabe poco acerca de su estructura. De hecho, todavia no hay datos disponibles con resolucion atomica para ninguna de las helicasas. En esta memoria, se han utilizado microscopia electronica y tecnicas de procesamiento de imagenes para estudiar la estructura tridimensional de dos helicasas representativas: la dnab de escherichia coli y el antigeno t de sv40 que lleva a cabo su funcion en celulas de mamiferos. En ambos casos, se han encontrado caracteristicas relevantes de su actividad: las dos poseen un canal central que va de lado a lado de la particula y esta abierto en ambos extremos, y tambien presentan una polaridad definida. La aparicion de rasgos estructurales comunes, y relevantes para su actividad enzimatica, en dos helicasas alejadas en la escala evolutiva sugiere la existencia de un modelo general de estructura-funcion para las helicasa hexamericas, conservado a lo largo de la evolucion.