Caracterización molecular de lacasas de pleurotus eryngiiexpresión heteróloga de estas enzimas y aplicaciones en la degradación de contaminantes aromáticos

Resumo

Los hongos de podredumbre blanca constituyen un interesante grupo de organismos con gran potencial biotecnológico debido a su habilidad para degradar el polímero de lignina y compuestos aromáticos estructuralmente relacionados. Esta potencialidad se basa principal-mente en el sistema extracelular implicado en la degradación de lignina, compuesto por diferentes tipos de enzimas (peroxidasas y oxidasas extracelulares) y compuestos de baja masa molecular. En este trabajo se ha llevado a cabo el estudio de la capacidad de los hongos de podredumbre blanca del género Pleurotus para transformar y mineralizar los compuestos aromáticos 2,4-diclorofenol, compuesto organoclorado de naturales fenólica y benzo(a)pireno, hidrocarburo aromático policíclico de naturaleza no fenólica. Estos compuestos aromáticos están relacionados con problemas de contaminación en ecosistemas terrestres. Los resultados presentados en esta tesis muestran que los hongos del género Pleurotus son capaces de trans-formar y mineralizar estos compuestos, lo que confirma su potencial aplicación en estrategias de biorremediación. Estudios anteriores mostraban ciertas dudas sobre la implicación de enzimas ligninoliticas en la degradación de este tipo de contaminantes medioambientales por hongos del género Pleurotus. Sin embargo, los estudios in vitro realizados en esta tesis con las enzimas ligninolíticas lacasa y peroxidasa versátil purificadas del hongo Pleurotus eryngii, así como la detección de estas actividades durante los procesos de transformación en cultivo, sugieren su implicación en la degradación de 2,4-diclorfenol y benzo(a)pireno y confirman los resultados obtenidos con otros basidiomicetos de podredumbre blanca. Finalmente, se ha llevado a cabo una aproximación molecular al estudio de las actividades ligninolíticas secretadas por el hongo P.eryngii. En este sentido, se han identificado, clonado y secuenciando dos nuevos genes de lacas en este hongo.