Obtención, clonación y expresión de la toxina de Echiichthys vipera en Escherichia coli, Pichia pastoris y Nicotiana tabacum con la ruta de glicosilación humanizada
- Rodríguez Rama, José Luis
- Tomás González Villa Doktorvater
- Trinidad de Miguel Bouzas Doktormutter
Universität der Verteidigung: Universidade de Santiago de Compostela
Fecha de defensa: 22 von April von 2022
- Carlos Rodríguez Osorio Präsident
- Pilar Blanco Camba Sekretär/in
- Gonzalo Sacristán Pérez-Minayo Vocal
Art: Dissertation
Zusammenfassung
En el presente trabajo se aborda la búsqueda y caracterización de la toxina presente en el veneno de E. vipera, persiguiendo obtener su secuencia codificante y producirla de forma heteróloga en tres organismos comúnmente utilizados para este fin: E. coli, P. pastoris y N. tabacum. Simultáneamente se desarrollaron plantas de N. tabacum con su ruta de glicosilación modificada, con el fin de que produzcan glicanos parcialmente humanizados. Los trabajos se centran en la generación de construcciones capaces de silenciar o reducir la expresión de los genes β1,2-xylosyltransferasa y α1,3- fucosyltransferasa, empleando para ello sistemas de ARN interferentes (ARNi), así como la inserción del gen β1,4-galactosiltransferasa humano para la producción de proteínas con potencial interés de uso en humanos, como podría ser la toxina de E. vipera.