Estudio quimico y estructural de la carboxipeptidasa ainteraccion con inhibidores anionicos inorganicos y pseudoproductos de la hidrolisis enzimatica
- DONAIRE GONZÁLEZ, ANTONIO
Universidade de defensa: Universitat de València
Ano de defensa: 1991
- Virtudes Moreno Martínez Presidente/a
- Juan Manuel Salas Peregrín Secretario/a
- Pilar González Duarte Vogal
- José Sergio Casas Fernández Vogal
- Juan Faus Payá Vogal
Tipo: Tese
Resumo
SE HA ESTUDIADO LA INTERACCION DE LA CARBOXIPEPTIDASA A CON INHIBIDORES INORGANICOS TALES COMO CLORURO, AZIDA, FOSFATO Y PIROFOSFATO, ASI COMO EL EFECTO QUE CIERTOS AMINOACIDOS Y CARBOXILATOS (L-FENILALANINA, D-FENILALANINA, FENILACETATO, ACETATO) PRODUCEN EN DICHA UNION. SE HAN UTILIZADO LAS TECNICAS DE ESPECTROSCOPIA UV-VISIBLE, RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE 35CL, 31P, 1H Y 13C Y DICROISMO CIRCULAR. A PARTIR DEL ESTUDIO DE LA VARIACION ESPECTROSCOPICA DEL DERIVADO DE CO(II), COCPA, Y DE COMPLEJOS BINARIOS Y TERNARIOS SUYOS CON EL PH SE HA ASIGNADO A LA MOLECULA DE AGUA COORDINADA AL ION METALICO COMO GRUPO RESPONSABLE DEL 2PKA DEL ENZIMA NATIVO, QUE REGULA LA ACTIVIDAD CATALITICA DE CPA A PH ALTO. LA UNION DE AMINOACIDOS Y CARBOXILATOS EN LA CAVIDAD ENZIMATICA PRODUCE UNA DISMINUCION DEL VALOR DE ESTE 2PKA, ASI COMO UN AUMENTO DRASTICO EN LA AFINIDAD DE LOS ANIONES CLORURO Y AZIDA AL ENZIMA. LOS ANIONES FOSFATO Y PIROFOSFATO SE UNEN AL ENZIMA SIN NECESIDAD DE LA PRESENCIA DE ESTOS AMINOACIDOS EN LA CAVIDAD. ESTOS ANIONES SE UNEN DIRECTAMENTE AL ION METALICO DE CPA. SE HA CARACTERIZADO EL DERIVADO METALOSUSTITUIDO DE NI(II), NICPA, ASIGNANDO LAS SEÑALES DEL ESPECTRO 1H NMR A PROTONES DE LAS HISTIDINAS COORDINADAS AL ION METALICO. A PARTIR DE ESTE ESTUDIO SE SUGIERE UNA GEOMETRIA OCTAEDRICA PARA EL NIQUEL EN NICPA. LOS AMINOACIDOS L-FENILALANINA Y D-FENILALANINA FORMAN COMPLEJOS DE ESTEQUIOMETRA 1:1 Y 1:2 CON NICPA. LA PRIMERA POSICION DE UNION DE ESTOS AMINOACIDOS ES UNA POSICION NO METALICA, PROBABLEMENTE LA ARGININA 145, MIENTRAS QUE LA SEGUNDA POSICION ES LA PROPIA ESFERA DE COORDINACION DEL ION METALICO.