Clonacion y caracterizacion del gen pbr1 de saccharomyces cerevisiae

Resumo

La pared celular en la levadura de gemacion saccharomyces cerevisiae esta constituida principalmente por 3 clases de polisacaridos que son quitina, manoproteinas y glucano; dentro de este ultimo se incluye el b(1,3) glucano, que es el componente estructural mayoritario de la pared en esta levadura. La papulacandina b es un antifungico que interfiere especificamente con la biosintesis del b(1,3) glucano, produciendo una inactivacion de la enzima b(1,3) glucan sintasa. Se han obtenido un mutante de s. Cerevisiae resistente a papulacandina b y se ha clonado el gen silvestre correspondiente por complementacion del fenotipo mutante de resistencia. La secuencia nucleotidica del gen indica que, tiene su fase de lectura abierta de 5.091 bp, codificando una proteina de 1.697 aminoacidos con su peso molecular reducido de 194.200 dalton. La interrupcion del gen pbr1 produce una drastica reduccion de la actividad especifica b(1,3) glucan sintasa y el fenotipo de la estirpe construida es de sensibilidad a la papulacandina b. Finalmente, el gen pbr1 esta localizado en el cromosoma xii de saccharomyces cerevisiae.