Determinación de la longitud telomérica en adn dental y su utilidad para la estimación de la edad

  1. Márquez Ruiz, Ana Belén
Supervised by:
  1. Lucas González Herrera Director
  2. Aurora Valenzuela Garach Director

Defence university: Universidad de Granada

Fecha de defensa: 30 June 2017

Committee:
  1. José Antonio Lorente Acosta Chair
  2. Juan Antonio Marchal Corrales Secretary
  3. María Begoña Martínez Jarreta Committee member
  4. Miguel Padial Molina Committee member
  5. María Victoria Lareu Huidobro Committee member

Type: Thesis

Abstract

La estimación de la edad del sujeto forma parte del complejo proceso de identificación, constituyendo un problema que se presenta con relativa frecuencia en la práctica pericial forense de nuestros días. El diente, por sus particulares características, puede considerarse un elemento diagnóstico de inestimable interés en la predicción de la edad, tanto en sujetos vivos como en cadáveres recientes y restos cadavéricos. Tras el desarrollo completo de la dentición, a partir de la segunda década de la vida, la edad dental se estima en base a los cambios que acontecen en la estructura dentaria con el paso de los años. Sin embargo, la precisión de los métodos disponibles se reduce de forma considerable con la edad, además de no poder ser aplicados cuando la información morfológica es limitada. En este sentido, en las últimas décadas las investigaciones se han orientado hacia el estudio de los cambios que ocurren en los componentes bioquímicos y moleculares del diente durante el proceso natural de envejecimiento. Entre los métodos de biología molecular, el análisis del acortamiento de los telómeros se presenta como un prometedor biomarcador para la estimación de la edad en el ámbito forense. El objetivo principal de esta tesis doctoral fue determinar la longitud telomérica en muestras de ADN extraído de diente y analizar el grado de correlación entre esta longitud y la edad, con el fin de proponer un modelo estadístico de utilidad en la práctica forense que permita estimar la edad cronológica de un sujeto a partir de la longitud relativa telomérica. Del mismo modo, se pretendió evaluar la influencia del sexo y el tipo de diente en la misma. Para ello, empleando el método de la qPCR propuesto por Cawthon (2002), se determinó la longitud telomérica relativa, expresada como el ratio T/S relativo, en ADN de 91 dientes procedentes de sujetos de sexo conocido y edades comprendidas entre los 15 y los 85 años. Del presente trabajo se concluye que la longitud telomérica en ADN dental se correlaciona de forma significativa con la edad del individuo, no se ve afectada por el sexo y es mayor en los molares que en los demás tipos de dientes. Tras realizar un análisis de regresión lineal, se presenta una ecuación para estimar la edad de los sujetos a partir de la longitud relativa de sus telómeros determinada en ADN de diente, de utilidad en el campo forense para asignar un intervalo de edad que contribuya a la identificación del individuo, especialmente en aquellos casos en los que se disponga únicamente de restos esqueletizados. No obstante, el error estándar de la estimación hace que el método no pueda ser considerado lo suficientemente preciso para ser aplicado de forma aislada para la estimación forense de la edad, fundamentalmente en sujetos de edad avanzada. Bibliografía consultada: Bernadotte A, Mikhelson VM, Spivak IM (2016) Markers of cellular senescence. Telomere shortening as a marker of cellular senescence. Aging 8:3-11. doi: 10.18632/aging.100871 Cawthon RM (2002) Telomere measurement by quantitative PCR. Nucleic Acids Res 30:e47. doi: 10.1093/nar/30.10.e47 Cunha E, Baccino E, Martrille L, Ramsthaler F, Prieto J, Schuliar Y, Lynnerup N, Cattaneo C (2009) The problem of aging human remains and living individuals: a review. Forensic Sci Int 193:1-13. doi: 10.1016/j.forsciint.2009.09.008 Higgins D, Austin JJ (2013) Teeth as a source of DNA for forensic identification of human remains: a review. Sci Justice 53:433-441. doi: 10.1016/j.scijus.2013.06.001 Meissner C, Ritz-Timme S (2010) Molecular pathology and age estimation. Forensic Sci Int 203:34-43. doi: 10.1016/j.forsciint.2010.07.010 Takasaki T, Tsuji A, Ikeda N, Ohishi M (2003) Age estimation in dental pulp DNA based on human telomere shortening. Int J Legal Med 117:232-234. doi: 10.1007/s00414-003-0376-5 Publicación derivada de esta tesis doctoral: Márquez-Ruiz AB, González-Herrera L, Valenzuela A (2017) Usefulness of telomere length in DNA from human teeth for age estimation. Int J Legal Med. En prensa. doi: 10.1007/s00414-017-1595-5